质量控制

生产和纯化可以安全治疗患者的病毒载体的过程需要精确的质量控制

质粒拷贝数和病毒滴度检测

对于质粒和病毒的绝对定量检测,微滴式数字PCR可以提供无与伦比的检测精度和重复性。该方法不需要标准曲线,且比qPCR更简便易用。

Bio-Rad ddPCR AAV病毒滴度检测方案简单有效,允许用户快捷地定制ddPCR检测试剂以用于AAV滴度的精确测定,并帮助我们的客户将ddPCR应用到他们的AAV基因治疗项目中。


本产品仅限科研使用,不作为临床诊断。Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定区域的商标。

 

病毒载体鉴定和纯度

确认病毒载体蛋白的完整性、纯度和特征是基因治疗产品生产过程中不可或缺的一部分。对于AAV的分析,SDS-PAGE以及随后的凝胶染色是标准方法。荧光染料通常用于评价病毒纯度和鉴定。除凝胶分析外,还可能需要western blotting来鉴定终产品。此外,该技术也可用于确认衣壳的形成,以及利用AAV标准品估算病毒蛋白的比例。

免染凝胶技术利用Bio-Rad专利的三卤化合物,直接添加到聚丙烯酰胺凝胶中。经过快速的紫外激活后,该化合物通过与色氨酸残基共价结合来增强天然蛋白质的荧光。由于这种独特的性质,凝胶或膜上总蛋白的图像可以很容易地被多次捕获,且无需任何染色或脱色。

∎ 无需长时间染色

∎ 快速检查以评估病毒包装,其衣壳蛋白和蛋白纯度以及宿主细胞水平

∎ 获得蛋白质凝胶成像的灵敏度和多样性


本产品仅限科研使用,不作为临床诊断。Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定区域的商标。

 

残留检测

FDA和CDE都要求“将宿主细胞的 DNA残留控制在 10ng/剂 以内,将 DNA片段大小限制在 200bp以内”,利用ddPCR绝对定量的检测方法能够获得这类对灵敏度和特异性要求较高的测量结果,从而减少误差。

目前伯乐已有5款基于ddPCR的Vericheck系列残留检测试剂盒,可实现对基因治疗产品生产过程中涉及主要宿主DNA和支原体残留的绝对定量,实现快速、高灵敏度、精确的检测,更快的推动符合法规要求的产品上市。


本产品仅限科研使用,不作为临床诊断。Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定区域的商标。

 

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