生物分析
细胞治疗产品一般从四个方面进行生物分析:生物分布和细胞存续、药效学评价、免疫毒性、免疫原性。
生物分布和细胞存续
体内CAR-T细胞移植、扩增和持久性是长期治疗效果的关键参数。然而,由于流式细胞术等既定方法的检测限,可能较难以非常准确和精确的方式进行测量。因此,需要以更高的灵敏度定量评估体内CAR-T细胞的能力。
ddPCR可绝对定量样品中的转基因拷贝数。该方法可用于有效量化转染或转导T细胞中的CAR拷贝数,或对含有目标转基因的细胞计数。这对于抗体无法检测到的转基因尤其重要。
同时,基于ddPCR平台的Whole Cell DNA Workflow可测定单个细胞中基因转导或编辑的情况,在DNA 水平上准确测定修饰细胞的百分比,并以强大的灵敏度实现样本中低细胞数(100–1000 个细胞)的挑战。
另外,对于CAR-T细胞的分化、耗竭、存续等监测,仍主要使用流式细胞术,并需要针对CAR的高度特异性抗体。使用传统的抗体生成方法很难产生这种特异性。使用Bio-Rad HuCAL抗体定制服务可获得特异性抗体,尤其是针对特殊设计的新型CAR。
本产品仅限科研使用,不作为临床诊断。Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定区域的商标。
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在线课堂| ddPCR在CAR-T治疗药代动力学中的应用
药效学及免疫毒性评价
对于药效学评价涉及到的biomarker分析,以及免疫毒性评价中需考察的全身系统性细胞因子升高、多器官炎症反应等,可以通过Bio-Plex多重检测系统对96孔板中的单个样本实现多因子同时检测,这对于样本数量较多、样本量又较少的临床前和临床试验是极具优势。
本产品仅限科研使用,不作为临床诊断。Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定区域的商标。
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Bio-Plex用于CRS检测
免疫原性分析
免疫原性分析需要开发定制针对特定的抗体作为阳性参照。通过Bio-Rad HuCAL抗体定制服务可以获得这些特定的抗体。HuCAL是基于一个450 亿个全人源化抗体的文库,通过引导式筛选策略,可在8周内获得高特异性、低免疫原性或毒性的抗体,成功率高达90%。
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